3種松乳菇菌絲體生長(zhǎng)情況及生物學(xué)特性(二)
1.2.3原種培養(yǎng)基裝袋、滅菌,接種培養(yǎng)
按原種培養(yǎng)基配方比例稱取培養(yǎng)料主料、輔料,充分拌勻,調(diào)節(jié)含水量至60%,裝入12 cm×24 cm的聚丙烯塑料袋,每袋裝干料300 g,機(jī)械免鍋爐滅菌鍋LGB-1500*4500滅菌2 h,冷卻到30℃以下接種3種松乳菇菌種。每個(gè)處理接種5袋,3次重復(fù)。接種完將菌包放入人工氣候箱,保持溫度25℃,相對(duì)濕度65%~70%,避光培養(yǎng)。
1.3測(cè)定項(xiàng)目
1.3.1固體菌種培養(yǎng)基菌絲體生長(zhǎng)數(shù)據(jù)測(cè)量
3種松乳菇接種到培養(yǎng)基5 d后,根據(jù)菌落邊緣,將起始線畫(huà)在試管或菌袋上。之后以3 d為一個(gè)階段,對(duì)菌絲生長(zhǎng)潛力(顏色,密度,生長(zhǎng)潛力,菌落邊緣均勻性)進(jìn)行觀察并記錄。觀察到母種菌絲充滿試管,原種菌絲充滿整個(gè)菌袋后,用記號(hào)筆畫(huà)終止線。測(cè)量菌絲體的平均長(zhǎng)度和滿(管)袋天數(shù)。
菌絲體生長(zhǎng)數(shù)據(jù)測(cè)量:從菌絲的中心到生長(zhǎng)的最遠(yuǎn)端測(cè)得的半徑長(zhǎng)度作為菌絲生長(zhǎng)的長(zhǎng)度再除以菌絲滿管或者滿袋的時(shí)間得出菌絲日均生長(zhǎng)速度。
菌絲體生長(zhǎng)速率(mm·d-1)=菌絲體長(zhǎng)度(mm)/菌絲生長(zhǎng)期(d)。
菌絲干重測(cè)量:將培養(yǎng)10 d的松乳菇試管母種加熱,使其中的瓊脂完全溶解,再將其放入90~100℃熱水中漂洗2次,放入烘箱內(nèi)烘干后,采用電子天平稱重。
1.3.2液體培養(yǎng)基中的菌球個(gè)數(shù)、菌絲生長(zhǎng)速率
液體菌種培養(yǎng)7 d后,菌球基本布滿培養(yǎng)瓶,各品種松乳菇培養(yǎng)瓶依次用注射器抽取30 mL液體培養(yǎng)液,抽出后注射到培養(yǎng)皿上靜置,計(jì)數(shù)菌球個(gè)數(shù)并記錄。
1.4數(shù)據(jù)分析
采用Excel 2010軟件和SPSS 25.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。
2結(jié)果與分析
2.1不同松乳菇菌株原種菌絲生長(zhǎng)情況
從表1可知,在相同母種培養(yǎng)基中,靚麗乳菇生長(zhǎng)速度最快,日均生長(zhǎng)量為1.13 mm,紅汁乳菇菌絲的生長(zhǎng)速度相對(duì)較慢,靚麗乳菇與紅汁乳菇菌絲的生長(zhǎng)速度達(dá)顯著差異;多汁乳菇菌絲的生長(zhǎng)速度與靚麗乳菇和紅汁乳菇無(wú)顯著差異。
靚麗乳菇和多汁乳菇長(zhǎng)勢(shì)一致,均為菌絲濃密、粗壯,菌落邊緣整齊,靚麗乳菇菌絲萌發(fā)期白色,滿管白色間黃色,多汁乳菇萌發(fā)期白色,滿管白色間紅褐色;紅汁乳菇菌絲長(zhǎng)勢(shì)稍弱,萌發(fā)期白色,滿管白色間紅綠色。
3種松乳菇菌絲干重以靚麗乳菇(0.295 g)與多汁乳菇(0.273 g)值較大,紅汁乳菇菌絲干重值較小(0.186 g)。靚麗乳菇、多汁乳菇與紅汁乳菇菌絲干重差異達(dá)顯著水平。
2.2液體培養(yǎng)基中松乳菇菌絲的生長(zhǎng)情況
從表2可以看出,在搖床培養(yǎng)相同時(shí)間的每30 mL液體培養(yǎng)基中,靚麗乳菇在液體培養(yǎng)基中的菌球數(shù)量最多,平均達(dá)54.7個(gè)·(30 mL)-1,紅汁乳菇次之,靚麗乳菇與紅汁乳菇在液體培養(yǎng)基中的菌球數(shù)差異不顯著,多汁乳菇在液體培養(yǎng)基中的菌球最少,平均41個(gè)·(30 mL)-1,并與靚麗乳菇和紅汁乳菇在液體培養(yǎng)基中的菌球數(shù)達(dá)顯著差異。
表2不同松乳菇菌株在液體培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)速率
2.3不同松乳菇菌株原種菌絲生長(zhǎng)情況分析
由表3可知,在相同原種培養(yǎng)基中,3種松乳菇的菌絲生長(zhǎng)速度由快到慢依次為:靚麗乳菇(0.385 mm·d-1)、多汁乳菇(0.356 mm·d-1)、紅汁乳菇(0.293 mm·d-1)。靚麗乳菇和多汁乳菇在原種培養(yǎng)基上菌絲長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng),二者菌絲生長(zhǎng)速度無(wú)顯著差異;紅汁乳菇菌絲生長(zhǎng)速度較慢,且與靚麗乳菇和多汁乳菇差異顯著。
3種松乳菇菌絲滿袋時(shí)間為靚麗乳菇(35 d)<多汁乳菇(37 d)<紅汁乳菇(40 d)。
3種松乳菇在原種培養(yǎng)基中菌絲顏色,靚麗乳菇為白間黃,紅汁乳菇為白色間暗紅色,多汁乳菇為白間褐黃。
表3不同松乳菇菌株在原種培養(yǎng)基菌絲生長(zhǎng)情況
3討論與結(jié)論
在母種培養(yǎng)基中,靚麗乳菇與多汁乳菇生長(zhǎng)速度快、長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng),紅汁乳菇菌絲生長(zhǎng)速度較慢、長(zhǎng)勢(shì)弱,靚麗乳菇與紅汁乳菇菌絲的生長(zhǎng)速度達(dá)顯著差異;菌絲干重以靚麗乳菇(0.295 g)與多汁乳菇(0.273 g)值較大,紅汁乳菇較小(0.186 g),靚麗乳菇、多汁乳菇與紅汁乳菇菌絲干重達(dá)顯著差異。
在原種培養(yǎng)基中,3種松乳菇菌絲滿袋時(shí)間靚麗乳菇(35 d)<多汁乳菇(37 d)<紅汁乳菇(40 d)。靚麗乳菇和多汁乳菇菌絲生長(zhǎng)速度較快、長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng),紅汁乳菇菌絲生長(zhǎng)速度較慢,并與靚麗乳菇和多汁乳菇達(dá)顯著差異。
每30 mL液體培養(yǎng)基中,靚麗乳菇菌球數(shù)最多,達(dá)54.7個(gè),多汁乳菇菌球數(shù)最少,并與靚麗乳菇、紅汁乳菇菌球數(shù)達(dá)顯著差異。
在母種培養(yǎng)基中,靚麗乳菇滿管為白色間黃色,多汁乳菇滿管為白色間紅褐色,紅汁乳菇滿管為白色間紅綠色。在原種培養(yǎng)基中菌絲顏色,靚麗乳菇為白間黃,紅汁乳菇為白色間暗紅色,多汁乳菇為白間褐黃。
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