蒼鷺養(yǎng)殖如何控制沙門(mén)菌病？用什么藥好【藥敏試驗(yàn)二】
1.2.7試驗(yàn)動(dòng)物剖檢及細(xì)菌分離
小鼠攻毒之后注意觀(guān)察其精神狀態(tài)和死亡情況，待小鼠死亡后，采用常規(guī)剖檢方法先將小鼠腹腔打開(kāi)，再打開(kāi)胸腔，觀(guān)察各個(gè)臟器的病理變化，摘下肝臟以備分離細(xì)菌所用，待剖檢后，進(jìn)行細(xì)菌分離操作，以上操作都要求無(wú)菌。
1.2.8致病菌的鑒定
從死亡小鼠肝臟分離的細(xì)菌進(jìn)行革蘭染色鏡檢，對(duì)比從原始病料中分離的細(xì)菌，最終確定是否是主要致病菌。
1.2.9生化鑒定
通過(guò)純培養(yǎng)的細(xì)菌選擇典型菌落接種于8%兔鮮血瓊脂固體試管斜面培養(yǎng)基上置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12～24h，用鉤菌環(huán)挑選典型單個(gè)菌落接種于微量生化鑒定管中，接種完后，微量生化管放于滅菌平皿中切忌要保持水平放置，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24～48h，進(jìn)行觀(guān)察，記錄結(jié)果。
1.2.10藥敏試驗(yàn)
采用瓊脂紙片擴(kuò)增法，用高壓滅菌后的棉拭子蘸取擴(kuò)大培養(yǎng)后的菌液均勻涂布于8%兔鮮血瓊脂培養(yǎng)基上，為了保證涂布均勻，需要重復(fù)涂布3次，待水分干后，貼上藥敏紙片，輕輕按壓，確保其貼穩(wěn)，防止掉落和移動(dòng)，注意用鑷子夾取藥敏紙片貼于平板上時(shí)要確保藥敏紙片完全與培養(yǎng)基接觸，以免影響藥物擴(kuò)散不均勻。一個(gè)平皿貼7片紙片，最中間一塊，其余6塊均勻分布其周?chē)ＹN好藥敏紙片后放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)12～24h，觀(guān)察測(cè)量抑菌圈的大小，抑菌圈≧20mm為極度敏感；15～20mm為高度敏感；14～10mm為中度敏感；10mm以下大于0為低度敏感；等于0為不敏感。藥敏試驗(yàn)操作方法按2005年版CLSI／NCCLS M100－S15所述方法進(jìn)行。
2試驗(yàn)結(jié)果
2.1病原菌的鑒定
從蒼鷺肝臟分離的細(xì)菌在8%兔鮮血瓊脂培養(yǎng)基上置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)12～24h，生長(zhǎng)菌落形態(tài)都為邊緣整齊、光滑、濕潤(rùn)、半透明、略隆起的細(xì)小圓形菌落，沒(méi)有出現(xiàn)溶血環(huán)；S.S.瓊脂培養(yǎng)基上細(xì)菌生長(zhǎng)良好，長(zhǎng)成半透明、圓形、菌落中間有黑點(diǎn)的小菌落；在麥康凱培養(yǎng)基上都長(zhǎng)出半透明、光滑小菌落，挑取典型菌落進(jìn)行革蘭染色，結(jié)果為革蘭陰性菌，形態(tài)都為長(zhǎng)桿狀或短桿狀菌落，多數(shù)散在。通過(guò)細(xì)菌形態(tài)觀(guān)察、染色鏡檢及生化鑒定結(jié)果最終得出該細(xì)菌為沙門(mén)菌。
2.2試驗(yàn)動(dòng)物攻毒
將細(xì)菌擴(kuò)大培養(yǎng)物對(duì)小鼠進(jìn)行腹腔注射后，小鼠全部在12h之內(nèi)死亡，表中死亡時(shí)間為2只小鼠平均死亡時(shí)間，具體結(jié)果見(jiàn)表1。
表1動(dòng)物攻毒試驗(yàn)
2.3試驗(yàn)動(dòng)物病理剖檢及致病菌鑒定
通過(guò)對(duì)死亡小鼠進(jìn)行病理剖檢均發(fā)現(xiàn)小鼠肝臟腫大、壞死，心外膜少量點(diǎn)狀出血，腸道黏膜嚴(yán)重出血，腸壁變薄、變黃，臌氣。剖檢完死亡小鼠取下其肝臟進(jìn)行細(xì)菌分離，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，挑取單個(gè)菌落進(jìn)行革染色再鏡檢觀(guān)察，發(fā)現(xiàn)菌落形態(tài)大小、色澤都和原分離菌一致，鏡檢也發(fā)現(xiàn)和原分離菌的形態(tài)相同，因此得出原分離細(xì)菌為該病例主要致病菌。
2.4生化鑒定結(jié)果見(jiàn)表2。
2.5藥敏試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。
表2生化鑒定
表3藥敏試驗(yàn)
3討論
沙門(mén)菌病和大腸桿菌病屬于條件致病菌，人和動(dòng)物的沙門(mén)菌病一直是一個(gè)世界性問(wèn)題，沙門(mén)菌菌型繁多，分布廣泛，是一種重要的人畜共患病的病原體。沙門(mén)菌對(duì)于我國(guó)畜牧業(yè)的威脅越來(lái)越大，而且沒(méi)有很好的有效控制辦法，長(zhǎng)期以來(lái)，以治療、預(yù)防疾病和促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)為目的，不合理使用抗生素，導(dǎo)致抗生素過(guò)度使用或?yàn)E用，在抗生素的選擇性壓力下，沙門(mén)菌耐藥性不斷上升，這已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。沙門(mén)菌耐藥的生化反應(yīng)機(jī)制主要有5種：酶對(duì)抗菌藥物的修飾或破壞；外輸泵介導(dǎo)抗菌藥物的主動(dòng)外排；抗菌藥物的滲透障礙，導(dǎo)致藥物攝取減少；藥物作用靶位的改變；建立新代謝途徑，沙門(mén)菌發(fā)生耐藥性常常不是一種生化反應(yīng)機(jī)制起作用，而是兩個(gè)或多個(gè)不同的生化反應(yīng)機(jī)制共同作用。從而可以看出，要解決沙門(mén)菌的耐藥性問(wèn)題面臨非常嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。
本試驗(yàn)分離到的沙門(mén)菌可能是由于種蛋帶毒或者是由于野生放養(yǎng)于沼澤地而感染沙門(mén)菌，鑒于這種可能性，必須對(duì)種蛋和沼澤地的泥水進(jìn)行檢測(cè)，鑒于我國(guó)國(guó)情，在生產(chǎn)中常用國(guó)標(biāo)法，有條件的單位應(yīng)用自動(dòng)酶標(biāo)檢測(cè)儀，ELISA，PCR試劑盒檢測(cè)，做到從源頭消滅病原菌，才能更好地控制沙門(mén)菌病。蒼鷺養(yǎng)殖屬于特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖，養(yǎng)殖規(guī)模小，養(yǎng)殖戶(hù)數(shù)量少，可以借鑒的經(jīng)驗(yàn)更是很少，很多經(jīng)驗(yàn)都是靠養(yǎng)殖戶(hù)自己摸索，這無(wú)疑會(huì)走很多彎路，本試驗(yàn)得出的一些數(shù)據(jù)可能對(duì)于蒼鷺養(yǎng)殖能起到一個(gè)參考作用。
鑒于本試驗(yàn)得出的結(jié)論，對(duì)該病例的治療與預(yù)防提出以下建議措施：用環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、甲氧芐啶進(jìn)行交替使用拌料和飲水，使用多維、中草藥等增強(qiáng)免疫力的藥物進(jìn)行輔助治療；盡量減小養(yǎng)殖密度，保持空氣流通；對(duì)于投喂的魚(yú)粉飼料要進(jìn)行把關(guān)檢測(cè)，防治霉變及病菌污染。
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