菌核凈與解淀粉芽孢桿菌Cas02生長(zhǎng)曲線繪制，篩選出煙草赤星病防治效果更好的復(fù)配劑
煙草是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物，也是我國(guó)主要的稅收經(jīng)濟(jì)作物之一。煙草在大田生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)受到各種病原菌的侵染、危害，其中由半知菌亞門鏈格孢屬真菌鏈格孢菌(Alternaria alternata)引起的赤星病是一種重要侵染性病害。赤星病主要發(fā)生在煙草成熟期，侵染初期在葉片上出現(xiàn)黃褐色圓形小斑點(diǎn)，以后變成褐色，隨著病害擴(kuò)展病斑直徑可達(dá)1-2厘米，病斑質(zhì)脆易破，天氣干旱時(shí)有可能在病斑中部產(chǎn)生破裂。病害嚴(yán)重時(shí)，許多病斑相互連接合并，致使病斑枯焦脫落，進(jìn)而造成整個(gè)葉片破碎而無(wú)使用價(jià)值。
煙草赤星病的防治主要包括化學(xué)防治、農(nóng)業(yè)防治和生物防治等幾種方法，其中化學(xué)防治見效快，是目前主要的赤星病防治方法，但化學(xué)農(nóng)藥的長(zhǎng)期大量使用會(huì)導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性，同時(shí)藥劑殘留對(duì)環(huán)境的危害不容小覷。生物防治因其安全、對(duì)環(huán)境友好等特點(diǎn)而被廣泛關(guān)注，尤其是利用生防菌進(jìn)行病害的防控是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。
利用生防菌防控植物病害是一種環(huán)境友好、安全高效的方法，生防菌在植物葉際、根際等部位定殖后可以形成穩(wěn)定的群落，提供持續(xù)的防病作用，減少病害的反復(fù)發(fā)生。此外，一些生防菌具有廣泛的防治譜，能夠同時(shí)抑制多種植物病原菌。與化學(xué)農(nóng)藥相比，生防菌由于其作用機(jī)制多樣，病原微生物產(chǎn)生抗藥性的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較低。但是利用生防菌進(jìn)行病害也存在一些弊端，如生防菌見效慢、活性易受環(huán)境因素影響，防治效果可能出現(xiàn)波動(dòng)等問(wèn)題。
生防菌和化學(xué)藥劑通過(guò)不同的機(jī)制作用于病原體，聯(lián)合使用可以實(shí)現(xiàn)互補(bǔ)作用，提高防治效果。聯(lián)合使用還可以減少化學(xué)藥劑的使用量，延緩病原體對(duì)藥劑產(chǎn)生抗性的速度，延長(zhǎng)藥劑的有效期。生防菌不僅可以直接抑制病原體，還能夠激發(fā)植物的抗病性，增強(qiáng)植物自身的防御能力，這種誘導(dǎo)抗性的作用是化學(xué)藥劑難以實(shí)現(xiàn)的。此外，減少化學(xué)藥劑的使用量有助于降低農(nóng)藥殘留和環(huán)境污染，符合可持續(xù)農(nóng)業(yè)發(fā)展的要求。然而，使用生防菌-化學(xué)藥劑協(xié)同防治煙草赤星病的方法少有研究報(bào)道。
研究發(fā)現(xiàn)，菌核凈與解淀粉芽孢桿菌Cas02對(duì)煙草赤星病菌均有較高的毒力，同時(shí)生長(zhǎng)曲線表明兩者具有很好的相容性。且復(fù)配劑使用比單獨(dú)使用防治效果好，產(chǎn)生了良好的協(xié)同防治作用。針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，下面提供解淀粉芽孢桿菌聯(lián)合菌核凈在防治煙草赤星病中的應(yīng)用。
篩選防治煙草赤星病的高效、安全的復(fù)配劑，上述技術(shù)方案采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定菌核凈與解淀粉芽孢桿菌Cas02對(duì)煙草赤星病菌(Alternaria alternata)的毒力，通過(guò)繪制生長(zhǎng)曲線測(cè)定兩者之間的相容性。通過(guò)測(cè)定兩者不同復(fù)配比例對(duì)煙草赤星病菌的聯(lián)合毒力以及室內(nèi)盆栽防效試驗(yàn)篩選防治效果更好的復(fù)配劑。
由圖2解淀粉芽孢桿菌Cas02的生長(zhǎng)曲線可知，加入菌核凈抑制中濃度與不加菌核凈的NB培養(yǎng)基中培養(yǎng)的Cas02生長(zhǎng)情況基本一致，說(shuō)明該濃度下菌核凈與Cas02相容性很好，可進(jìn)行復(fù)配。
結(jié)果表明，菌核凈與解淀粉芽孢桿菌Cas02對(duì)煙草赤星病菌均有較高的毒力，EC50值分別為4.86μg/mL和OD600值為0.4916。生長(zhǎng)曲線表明兩者具有很好的相容性。除復(fù)配比例V(菌核凈)：V(Cas02)為1:9，8:2，9:1時(shí)沒有協(xié)同增效作用，其它比例均具有不同增效作用。其中，增效作用最好的是7:3，增效比率為1.32，實(shí)際抑菌率達(dá)到67.61％。室內(nèi)盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，兩種復(fù)配比例間差異不顯著，但是復(fù)配劑使用比單獨(dú)使用防治效果好，復(fù)配劑V(菌核凈)：V(Cas02)＝7:3時(shí)病情指數(shù)最低，與CK呈顯著差異，防治效果最好，達(dá)到75.71％。
上述技術(shù)方案操作步驟簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)，成本低，便于推廣實(shí)施，同時(shí)對(duì)煙草赤星病的防治效果極佳，具有良好的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
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